这项研究评估了来自健康镇静犬十二指肠 CEUS 的灌注参数的可重复性（日内差异性）和可再现性（日间差异性）。结果表明，十二指肠 CEUS 在健康镇静犬中的可重复性和再现性在临床上是可以接受的，所有灌注参数（包括 TTP，PI，AUC， WiR 和 WoR）的差异系数（CV）均小于 25％。
所有灌注参数的日内和日间 CV 范围为 2.27％至 23.41％（表 1）。在一项使用小鼠肿瘤模型的研究中，对于通过三次重复注射获得的 CEUS 衍生的灌注参数，CV 范围为 3.74％至 29.34％被认为是可以接受的[11]。在另一项针对健康猫（包括小肠）的腹部器官的定量 CEUS 的研究中，在短时间内重复检查的 CV 小于 25％被认为是可以接受的[20]。在人类医学中，使用 CEUS 进行的肾脏灌注研究也认为两次测量之间的变化超过 25％是显着的[32]。参考这些研究，从 CEUS 得出的灌注参数所需的 CV 截止值被认为是可以接受的 25％。
在我们的研究中记录了所有灌注参数的观察者内CV低（范围2.27–8.30％）。观察者内部的差异性表示由同一观察者连续多次对CEUS图像进行分析时的差异大小。一项研究评估了肝内血流动力学与CEUS在健康志愿者和肝癌患者中的再现性，研究了观察者内差异性，报道CV范围在5％至15％之间。在这项研究中，指定了一个观察者来两次分析所有扫查。作者认为，已记录的CV几乎是完美的[12]。
源自 CEUS 的灌注参数的变化可能与内部和外部因素有关。内部因素与动物生理相关，例如心输出量，血压和心率。在当前的研究中，HR 和两个灌注参数 TTP 和 WiR 之间存在显着的部分相关性。低心率导致更长的 TTP 和更低的WiR。MAP的日内和日间CV较低，但它们的心率较高，可能受生理状态，兴奋水平和镇静作用的影响（表1）。与其它三个参数（PI，AUC和WoR）相比，这可能是TTP和WiR的日间CV相对较高的原因。
影响灌注参数可变性的外部因素可能包括扫查和分析过程。由于其十二指肠蠕动，因此连续扫查十二指肠具有挑战性。因此，在离线分析期间，将ROI 小心地放置在粘膜中以避免产生噪音和伪影。人工放置 ROI 的分析结果可能会受到人为错误的影响，但在避免与肠道或呼吸运动有关的问题上，它比自动分析更好。我们在以前研究中使用的自动分析软件无法滤除此类运动的影响。此外，很难精确地在十二指肠的同一段中进行重复扫查并将 ROI 置于相同深度。通过标准化换能器方法以获得十二指肠的纵切面，我们将空间变化降至最低。
当前研究中十二指肠和生成的 TIC 的增强模式与先前对狗和猫的肠道 CEUS 的研究一致[9, 18, 19, 21]，描绘了十二指肠壁的壁血管化[15, 22]。在我们的 TIC 中，首次灌注后发现的再循环与健康猫中描述的相同[9]。但是，其他先前对狗的研究[18，19，21]的TIC中未对此进行描述，这可能是由于当前与先前研究之间微泡造影剂类型，剂量和图像设置的差异所致。再循环很可能只会引起强度的小幅增加，通常是平滑且逐渐的，因为大多数MB都是由于在初始循环过程中暴露于超声波束而被破坏的[33]。
从 TIC 导出的灌注参数为评估十二指肠的血液动力学变化提供了一种更为客观的方法。TTP，WiR 和 WoR 与血流速度相关，而 PI 和 AUC 与相应ROI 内的血容量相关[10]。这些参数可能会因慢性炎症而改变，由于生理和病理性血管生成，慢性炎症会导致肠道血管重排[1, 5]。研究了炎症性肠病（IBD）患者肠道中血管生成和微血管密度的增加，从而导致局部血流量增加。据报道血流仅在粘膜层和粘膜下层增加，而在肌肉层则保持不变[6, 17]。
即使已经报道了犬慢性肠病（CE）与人 IBD 之间的差异[3]，在肠道灌注中可以看到类似的病理变化。
当前研究中的 TTP，PI，AUC，WiR 和 WoR 值可为将来在临床实践中检查十二指肠灌注提供参考。此外，本研究提供的 95％ 置信区间（CI）涵盖了健康犬中每个灌注参数的平均值的实际范围（表 1）。换句话说，只有在该值低于或高于此间隔时， 才可以考虑与病理变化相关的真正改变。应该对患有慢性肠道疾病的犬进行进一步研究，以确认所评估的参数是否具有足够的敏感性和特异性。
与先前的报告相比，当前研究中的 TTP 较短[21]，因为我们选择了造影剂的到达时间而不是造影剂注入作为起点。我们在研究中确定了测量 TTP 的方法，以最大程度地减少全身血流量和/或造影剂注射速度的影响，并产生更好的可重复性和可再现性。由于扫查设置不同，PI 和 AUC 高于同一报告中记录的 PI 和 AUC。因此，当前研究中提供的参考值应仅用于具有相同方案的检查。
这项研究有几个局限性。首先，这项研究仅评估了十二指肠 CEUS 在镇静犬中的可重复性和可再现性。因此，这种方法在未镇定的狗中的可重复性和可再现性是未知的。与镇静犬相比，有意识的犬肝静脉 CEUS 的可重复性较低[23]。其次，即使在当前研究中，从十二指肠 CEUS 得出的灌注参数显示出可接受的日内和日间 CV，这些结果也不能保证该技术适用于其他超声检查者和/或其它超声机器。观察者之间的差异性也没有在这项研究中评估。第三，参加本研究的狗没有表现出与胃肠道疾病有关的任何症状或实验室检查结果，但由于未进行十二指肠的组织病理学评估，因此无法确认没有炎症性病变。
从结果可以得出结论，定量 CEUS 在评估健康镇静犬的十二指肠灌注中是可行的。TTP，PI，AUC，WiR 和 WoR 表现出足够的日内，日间和观察者内 CV。为了评估十二指肠 CEUS 的临床适用性，有必要对患有慢性肠道疾病的狗进行进一步的研究。
