经气管灌洗细胞学检查

图1  由于取样技术不当造成的口咽部污染是经气管灌洗细胞学检查的常见问题。在单独的口腔细菌旁有均匀的鳞状上皮细胞（黑色箭头），如此处所示的西蒙斯氏菌（红色箭头），表明口咽污染。西蒙斯氏菌可以通过其形态特征来识别，它类似于带有内部条纹的胶囊（即“堆积硬币”的外观）。改良式Wright’s染色法；总放大600倍

图2  正常的经气管灌洗液主要由肺泡巨噬细胞组成，通常占样本中有核细胞总数高达90%。肺泡巨噬细胞（白色箭头）是大的单核细胞，细胞核偏心排列，胞浆呈泡沫状，嗜碱性。中性粒细胞通常只占样本中有核细胞的5%-10%。其他可能出现的细胞类型包括小淋巴细胞(5%-14%)、嗜酸性粒细胞(通常在犬中高达5%，在猫中高达25%)和肥大细胞(<2%)。改良式Wright’s染色法；总放大600倍

图3  气管灌洗液中常见的其他细胞包括纤毛柱状呼吸上皮细胞(A)和杯状细胞(B)。纤毛柱状上皮细胞(A，黑色箭头)的存在通常表明液体已被充分提取。低数量杯状细胞(B，黑色箭头)或杯状细胞颗粒可能是正常的，而高数量可能表明杯状细胞增生，这是慢性炎症的一个指标。改良式Wright’s染色法；总放大1000倍

图4  粘液常见于正常和异常的气管冲洗标本，背景中可见蓬松的粉红色物质或浓缩后呈深紫色至蓝色螺旋状物质。后者被称为库施曼氏螺旋物Curschmann’s spirals (黑色箭头)，表明有小的气道疾病。改良式Wright’s染色法；总放大1000倍

图5  当中性粒细胞占大多数时(黑色箭头)可提示急性或慢性炎症。当中性粒细胞百分比增加时，应彻底检查液体中是否有感染性病原体(包括细菌和真菌)，特别是中性粒细胞在外观上有退行性变化时。化脓性炎症的非感染性原因包括异物性肺炎和肿瘤增生。改良式Wright’s染色法；总放大600倍

图6  嗜酸性粒细胞(黑色箭头)是白细胞的一种，因其胞浆颗粒易于被伊红染色而得名。它们通常在犬的气管灌洗液中很少见，通常只占有核细胞数的5%。猫的嗜酸性粒细胞百分比变化很大，据报道可高达25%。无论哪种情况，当它们占有核细胞总数的10%以上时，应考虑嗜酸性炎症可能与临床信息相关。嗜酸性炎症的原因包括过敏/超敏反应、嗜酸性肺炎/肺浸润性嗜酸性粒细胞增多症(PIE)、寄生虫病、曲霉菌病或副肿瘤综合征。在极少数情况下，细菌性肺炎可引起嗜酸性炎症。改良式Wright’s染色法；总放大600倍

图7  在气管灌洗液中发现的所有细胞类型中，退行性中性粒细胞最常与细菌性肺炎有关。细菌性肺炎的诊断需要胞内微生物的存在(黑色箭头)。背景中也可能有微生物存在，但这可能只表明污染，在没有胞内细菌的情况下，应谨慎解释细胞外细菌。细菌性肺炎通常由单一形态细菌组成；然而，吸入性肺炎可能出现混合形态菌群。气管灌洗样本应尽快运回实验室，防止细菌过度生长。样本在4°C保存时，即使超过24小时，也很少发生细菌增殖；然而，未冷藏的样本面临着致病性或污染性微生物快速过度生长的风险，这可能会混淆细胞学解释。在样本采集后，应尽早进行至少一次直接或浓缩涂片，以进行细胞学检查；这张涂片可以作为取样时病理学家关于细胞形态和细菌种属的参考点。涂片应与收集的液体一起送到实验室。改良式Wright’s染色法；总放大1000倍

图8  虽然化脓性炎症是细菌性肺炎的主要特征，但分支杆菌属除外。肉芽肿性或化脓性肉芽肿性炎症在这类感染最常见。巨噬细胞通常占多数；在巨噬细胞中，多核巨细胞和上皮样巨噬细胞是常见的。在细胞学标本中，分枝杆菌看起来是无色棒状结构(黑色箭头)。抗酸染色可以确认它们的存在。改良式Wright’s染色法；总放大1000倍

图9A  全身性真菌虽然更常见于肺脏细针采样样本，但有时可以从气道冲洗液中发现。皮炎芽生菌(白色箭头)是一种双态性真菌，经常感染犬的肺部，有时也感染其他器官。猫不常被感染。在经气管灌洗液中，芽生菌是最常以酵母形式被识别的，尽管菌丝形式也可能在罕见的情况下被看到。改良式Wright’s染色法；总放大600倍

图9B  皮炎芽生菌的酵母型式(白色箭头)为圆形，深蓝色，直径5-20 μm，壁厚，芽殖范围宽（即与隐球菌属的窄芽殖相比，皮炎芽生菌的酵母型式芽殖的“颈部”较宽）。皮炎芽生菌通常伴有化脓性肉芽肿性炎症。改良式Wright’s染色法；总放大1000倍

图10  荚膜组织胞浆菌(白色箭头)与感染犬和猫的其他双态性真菌一样，通常引起化脓性肉芽肿性炎症。其酵母形式比皮炎芽生菌小得多(直径1 ~ 4 μm)，细胞核呈紫色，胞质轻度嗜碱性，胞晕较薄。它们通常在巨噬细胞中发现，并分散在整个背景中。在这张图片中，微生物旁边的大部分有核细胞都崩解了，这可以从分散在各处的紫色核质中得到证明。改良式Wright’s染色法；总放大600倍

图11  肿瘤疾病也可以通过经气管灌洗细胞学鉴定。原发性和转移性都可以用这种方法诊断。如图所示，气管灌洗样本中最常见的肿瘤是上皮细胞癌。上皮细胞癌表现为片状或簇状的多形性细胞，细胞间连接清晰，具有多种恶性特征，包括明显的核仁、显著的细胞大小不等和细胞核大小不等。在液体样本中，包括气管灌洗液，上皮细胞癌细胞分散，呈圆形，形态各异。这些细胞通常相当大(>直径20 μm)，有较高的核质比，深嗜碱性胞浆，大而圆的细胞核伴随恶性肿瘤的特征。改良式Wright’s染色法；总放大600倍